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細胞培養基的相關知識點分析

發布日期: 2020-04-02
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   細胞培養基是專門為正常人類微血管內皮細胞體外培養設計的適于其生長的*培養基。是經滅菌的液體培養基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質和低濃度胎牛血清(5%)。該培養基緩沖體系為重碳酸鹽,在含5%CO2的細胞培養箱中平衡后pH值為7.4。該培養基的配方能夠選擇性的促進正常人類微血管內皮細胞體外培養中的增殖和生長,并為其達到理想營養平衡狀態。
  細胞培養的意義
 ?、笨梢赃M行植物體外受精及植物胚胎發育過程研究。
  ⒉可以進行植物生長發育有關的重要基因或影響因素的研究。
 ?、晨梢苑奖愕赝ㄟ^實驗手段培育植物新品種。
  細胞培養基優點:
  - 成份確定:無需飼養層的人多能干細胞培養基;
  - 充分驗證:> 1100篇同行評審的文獻中被引用;
  - 效果穩定:含有預篩選的成份(包括BSA),使培養基效果穩定,且能夠保護培養物免受內毒素和培養環境壓力的影響;
  - *的培養hPSC的金標準;
  - 已經用于60多種iPS細胞系。
  細胞培養基使用的注意事項:
  (1)細胞培養用水一般為三蒸水(經石英蒸餾器蒸餾)或超純水,醫藥生產上一般為注射用水。
  (2)建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,因為包裝一旦打開,組分可能會變質或因受潮而結團。
 ?。?)溶解干粉培養基時先加入終體積90%~95%的培養用水,添加劑加完后再補足。
  (4)如需添加的組分較多時,某一組分*溶解后,再添加另一組分。
 ?。?)待培養基*溶解后再加入碳酸氫鈉,以免產生沉淀。
 ?。?)所有成分*溶解后,培養基應立即過濾或高壓除菌,以免產生沉淀或有微生物污染。
 ?。?)由于除菌過濾后,pH值可能會升高0.1~0.2個單位,因此在過濾前,可將pH調至比所需值低0.1~0.2個單位。
 ?。?)在細胞培養過程中,建議不加或加少量的抗生素,如血清的濃度較低則所加抗生素的量也要相應降低一些。
 ?。?)建議用1NHCl或1NNaOH來調節培養基的pH,因為用碳酸氫鈉調pH值對培養液的滲透壓影響比較大。
  細胞培養基是人工模擬細胞在體內的生長環境,是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎。當它是粉劑時,傾向性地稱為培養基,將粉劑配成液體后,多稱為培養液。培養液中常補加血清、抗生素等營養成分。
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