HT115(DE3)感受態細胞

關于培養瓶內加入培養基的量的問題。
這個是要靠自己去摸索你所養的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml，大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養基少一點相反細胞形態會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優勝劣汰吧。呵呵。）對于生長速度快的細胞，易生長的細胞加少一點培養基細胞形態會更好。但是要注意換液掌握。
關于選擇培養瓶的問題。
個人發現生長速度快的細胞在玻璃瓶內生長的狀態會比一次性塑料瓶相對好一些。而對于同一種細胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內的生長狀態也比塑料瓶內好。這可能是因為塑料瓶比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在塑料瓶這種相對“更安逸”的環境里反而長得狀態不如玻璃瓶好。
所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態，塑料瓶比玻璃瓶會好，對于生長速度慢的細胞，玻璃瓶則會更好。同樣，對于同一種細胞，在其生長速度慢的時候，塑料瓶會好一點，比如剛剛復蘇的時候，或者原代培養的時候。而在其生長旺盛的時候，玻璃瓶則相對會好一點。

HT115(DE3)感受態細胞

消化/傳代。

1、移去MEF培養基

2、用5ml不含鈣鎂離子的PBS洗滌細胞(以去除胰蛋白酶的抑制物)。

3、每個培養瓶里加入1.5ml的胰蛋白酶/EDTA(0.05%的胰蛋白酶)，消化5min。

4、為了使細胞分散開，輕輕吹打細胞。

5、每加入1ml的胰蛋白酶/EDTA，加入至少1ml的MEF培養基以終止胰蛋白酶的消化。

6、將細胞懸液加入到15ml的錐形管中，吹打幾次，使細胞分散為單個的。

7、在新的T75培養瓶中加入10mlMEF培養基。

8、將細胞懸液分裝到新的T75培養瓶中，放在37℃培養箱中進行培養。

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