WM-115人黑色素瘤貼壁細胞

對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書，注意每批的細節。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。

來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等)，活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
服務流程:
預約登記→辦理相關手續→復蘇細胞→細胞質量檢查→發送細胞(或自己來取細胞)→細胞售后技術咨詢答疑。
培養方法如下:
1、從手術室無菌取腦髓灰質或白質后，仔細剝除腦膜、血管和纖維成分，置Hanks液中漂洗一、二次。
2、置于30—50倍體積的Hanks液中，此時腦組織比較柔軟，反復吹打即制成細胞懸液。
3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后，細胞或細胞團快自然下沉，脂肪等雜物易漂浮，可吸除上層、反復二、三次，即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細胞成分。
4、在沉降物中加入適量培養液，通過紗網成紗布過濾，計數并調整細胞密度。
5、接入培養瓶或皿中，置5%CO2溫箱中培養。適應環境過程較長，接種后貼壁較慢。貼壁后短期內也可能不見細胞分裂現象，然而一旦生長后即能迅速進入旺盛的增殖狀態。細胞傳代可以0.25%胰酶消化處理。

WM-115人黑色素瘤貼壁細胞

注意事項:

1.收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2.先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置數小時(4h左右)，穩定細胞狀態，切忌在溫箱內靜置過夜。

3.靜置后鏡檢，拍照，記錄細胞狀態。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。

4.  懸浮細胞:將細胞瓶內液體都轉移至無菌離心管內，1000 轉/分鐘離心5min，培養基上清可備用，管底細胞沉淀用培養基重懸。鏡檢時若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞瓶內培養;若密度未超過80%，細胞懸液移至原瓶繼續培養，待達到80%時再正常傳代。備注:聚團生長慢，有密度依賴，必須使用T25培養瓶豎立培養，3天一次半量換液一次，1-2周傳代一次。

貼壁細胞:若細胞密度超過80%，可正常傳代;若未超過80%，收集細胞瓶內的培養基，留8ml繼續培養至80%左右再傳代，瓶蓋可稍微擰松。備注:細胞貼壁慢，傳代后細胞放2天不動。

5.細胞瓶內的培養基含血清和雙抗，可收集后4℃保存備用，可補加2%血清。剛開始傳代時建議一半用細胞瓶內的培養基，一半用客戶自備的培養基，使細胞逐漸適應培養條件，以免因不適應而造成生長狀態不佳。

6.因為培養過程外因太多，所以我們的售后保障期為一周，超過一周的細胞我們會酌情處理，但不提供免費更換服務。

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